描述:上海臻科生物科技有限公司專(zhuān)業(yè)研發(fā)地塞米松快速檢測試劑盒。產(chǎn)品具有靈敏度高、特異性強,重復性好的特點(diǎn)。可檢測生長(cháng)因子、炎癥因子等,適用血清、血漿、組織、尿液等多種標本類(lèi)型檢測。為充分滿(mǎn)足了廣大科研學(xué)者的需求我司特別推出定制ELISA試劑盒和專(zhuān)業(yè)免費代測兩大服務(wù),如需了解更多可我司客服專(zhuān)員。
一.地塞米松快速檢測試劑盒原理及用途
地塞米松快速檢測試劑盒采用間接競爭ELISA方法檢測尿樣、組織、飼料等樣本中的地塞米松,試劑盒由預包被偶聯(lián)抗原的酶標板、辣根酶標記物、抗體、標準品及其他配套試劑組成。檢測時(shí),加入標準品或樣品溶液,樣本中的地塞米松和酶標板上預包被偶聯(lián)抗原競爭抗地塞米松抗體,加入酶標記物后,用TMB底物顯色,樣本吸光度值與其所含地塞米松含量成負相關(guān),與標準曲線(xiàn)比較即可得出樣本中地塞米松的殘留量。
二.技術(shù)指標及組成
試劑盒靈敏度:0.05ppb(ng/ml)
反應模式:25℃,30min~15min
酶標板、標準品、高標準品、酶標記物、抗體工作液、底物液A、底物液B、終止液、濃縮洗滌液、復溶液
三.【*優(yōu)勢】
1、產(chǎn)品種類(lèi)齊全、質(zhì)量可靠、*、靈敏度高、效果穩定、易保存、操作簡(jiǎn)便
2、免費提供產(chǎn)品報價(jià)、實(shí)驗原理、產(chǎn)品用途及中英文說(shuō)明書(shū)
3、發(fā)貨及時(shí)(上海本地客戶(hù)有專(zhuān)門(mén)人員送貨上門(mén)及取標本)
4、免費提供ELISA代測服務(wù),臻科擁有自己的實(shí)驗室(北京、上海、武漢)和技術(shù)團隊,公司提供*的售前、售中、售后,為您解決實(shí)驗過(guò)程中遇到的問(wèn)題。想要了解更多臻科實(shí)驗代做服務(wù),請。
四.需要的器材
儀器:酶標儀、打印機、均質(zhì)器 、氮氣吹干裝置、振蕩器、離心機、刻度移液管、天平(感量0.01g)
微量移液器:?jiǎn)蔚?0µl-200µl,100µl-1000µl、多道300µl
五.樣本處理前須知:
實(shí)驗器具必須潔凈并使用一次性吸頭,以避免污染干擾實(shí)驗結果。
配液:
配液1:0.1M HCl 溶液 取0.86ml濃HCl加去離子水至100ml。
配液2:0.1M NaOH 溶液 稱(chēng)取0.4g NaOH加去離子水至100ml。
配液3:乙腈-0.1M HCl 溶液 V乙腈:V0.1M HCl =84:16。
配液4:復溶液
將10×復溶液用去離子水10倍稀釋?zhuān)糜跇颖镜膹腿埽瑥腿芤涸?℃環(huán)境可保存一個(gè)月。
六.操作流程
將所需試劑從4℃冷藏環(huán)境中取出,置于室溫平衡30min以上, 洗滌液冷藏時(shí)可能會(huì )有結晶需恢復到室溫以充分溶解,每種液體試劑使用前均須搖勻。取出需要數量的微孔板及框架,將不用的微孔板放入自封袋,保存于2-8℃。
實(shí)驗開(kāi)始前,用去離子水將20×濃縮洗滌液按20倍稀釋成工作洗滌液。
編 號:將樣本和標準品對應微孔按序編號,每個(gè)樣本和標準品做2孔平行,并記錄標準孔和樣本孔所在的位置。
加樣反應:加標準品或樣本50µl/孔到各自的微孔中,然后加酶標記物50µl/孔,再加入50µl/孔的抗體工作液,用蓋板膜封板,輕輕振蕩5秒混勻,25℃反應30分鐘。
洗 滌:小心揭開(kāi)蓋板膜,將孔內液體甩干,用工作洗滌液250µl/孔充分洗滌5次,每次間隔30秒,用吸水紙拍干(拍干后未被清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破)。
顯 色:每孔加入底物液A 50µl,再加底物液B 50µl,輕輕振蕩5秒混勻,25℃避光顯色15分鐘。
終 止:每孔加入終止液50µl,輕輕振蕩混勻,終止反應。
測吸光值:用酶標儀于450nm處測定每孔吸光度值(建議用雙波長(cháng)450/630nm)。測定應在終止反應后10分鐘內完成。
七. 結果分析
百分吸光率的計算
標準液或樣本的百分吸光率等于標準液或樣本的百分吸光度值的平均值(雙孔)除以*個(gè)標準液(0ppb)的吸光度值,再乘以100%,即
百分吸光度值(%)= | A | ×100% |
A0 |
A—標準溶液或樣本溶液的平均吸光度值
A0—0ppb標準溶液的平均吸光度值
標準曲線(xiàn)的繪制與計算
以標準液百分吸光率為縱坐標,對應的標準液濃度(ppb)的對數為橫坐標,繪制標準液的半對數曲線(xiàn)圖。將樣本的百分吸光率代入標準曲線(xiàn)中,從標準曲線(xiàn)上讀出樣本所對應的濃度,乘以其對應的稀釋倍數即為樣本中待測物的實(shí)際濃度。
若利用試劑盒專(zhuān)業(yè)分析軟件進(jìn)行計算,更便于大量樣本的準確、快速分析。(索取)
八.注意事項
室溫低于25℃或試劑及樣本沒(méi)有回到室溫(25℃)會(huì )導致所有標準的OD值偏低。
在洗板過(guò)程中如果出現板孔干燥的情況,則會(huì )出現標準曲線(xiàn)不成線(xiàn)性,重復性不好的現象。所以洗板拍干后應立即進(jìn)行下一步操作。
混合要均勻,洗板要*,在ELISA分析中的再現性,很大程度上取決于洗板的*性。
在所有孵育過(guò)程中,用蓋板膜封住微孔板,避免光線(xiàn)照射。
不要使用過(guò)了有效期的試劑盒,不要交換使用不同批號試劑盒中的試劑。
顯色液若有任何顏色表明變質(zhì),應當棄之。0標準的吸光度值小于0.5個(gè)單位(A450nm< 0.5 )時(shí),表示試劑可能變質(zhì)。
反應終止液有腐蝕性,避免接觸皮膚。
九.特別說(shuō)明
由于不同指標檢測的樣本是不同的,處理方式也是不盡相同,如需了解更多,更詳細的技術(shù)參數可我司客服專(zhuān)員,歡迎廣大社會(huì )各界朋友前來(lái)咨詢(xún)和了解。